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【图鉴】基因工程图鉴：剪刀、浆糊与快递
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本次答对
下列DNA中，一般不用作克隆载体的是
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载体按功能分为克隆载体和表达载体两大类，其中克隆载体用于外源DNA片段在受体细胞中的克隆扩增。常用的克隆载体主要有质粒DNA(A对)、噬菌体DNA(D对)和病毒DNA(C对),为了增加克隆载体插入外源基因的容量，还设计有柯斯质粒、细菌人工染色体、酵母人工染色体(E对)等载体。大肠杆菌的基因组包括染色体DNA和质粒DNA两个部分，染色体DNA(即选项中的大肠杆菌DNA)不具备克隆载体的基本特点(自主复制、选择标志及单一酶切位点),一般不用作克隆载体(B错，为本题正确答案)。
故事情境
载体是运输工具，要求有复制起点、选择标志、单一切点。这道题在本篇的"〇.5 术语基石"和"2.2 选"里都有落点：U 盘才叫载体，细菌自己的染色体是主机硬盘，拆不下来当 U 盘用。 **
易错点
别把"大肠杆菌 DNA"和"质粒 DNA"混成一个东西。大肠杆菌的基因组里确实有质粒，但选项说的是染色体 DNA，也就是拟核，它不具备载体那三条。
题号 ZT-2006N033A
作为克隆载体的最基本条件是
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克隆载体可携带外源DNA片段，并利用载体的自我复制功能实现外源DNA片段在受体细胞中的无性繁殖和扩增，因此作为克隆载体的最基本条件就是具有自我复制功能(C对),放宽至基本条件，还应包括至少有一个选择标志(遗传标志)(D错)、有适宜的限制性核酸内切酶的单一切点等。常用的克隆载体包括质粒DNA、噬菌体DNA、病毒DNA、柯斯质粒、细菌人工染色体、酵母人工染色体等，而环状双链DNA分子(B错)只是质粒DNA的形态特点。细菌人工染色体、酵母人工染色体及部分质粒的DNA分子量并不小(A错),可达100kb以上。
故事情境
载体三条件里，复制起点是"最基本"，因为它决定外源基因能不能跟着扩增。不能自己复制，装进去也是一次性的。 **
易错点
D"有一定遗传标志"确实是基本条件，题干问的是"最基本"，只能选 C。B 是质粒的形态，不是载体的通用条件。
题号 ZT-2011N039A
在DNA重组技术中使用质粒的目的是
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质粒是细菌染色体外的，能自主复制和稳定遗传的双链环状DNA分子，是DNA重组技术中最常用的克隆载体，其目的是携带外源DNA(目的基因)进入受体细胞中复制扩增(B对)。
故事情境
U 盘的岗位是装货和送货，不是改造主机。质粒复制的是它自己，不会去"促进宿主 DNA 复制"，也不会主动让宿主基因重组，更不管 RNA 剪接。 **
易错点
A 听着最像"复制起点"的作用，但质粒的复制起点是给自己的，不是给宿主染色体的。
题号 ZT-2019N026A
质粒的结构特点是
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质粒是细菌染色体外的、能自主复制和稳定遗传的双链环状DNA分子(C对),是重组DNA技术中最常用的克隆载体。
故事情境
四个选项只改两个维度：单链还是双链，DNA 还是 RNA。质粒是环状双链 DNA，两个维度都得对。 **
易错点
质粒"小"，容易让人联想成单链。小和单链没关系，它就是一个小的双链环。
题号 ZT-2022N026A
基因工程中黏性末端连接是指
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多数Ⅱ型RE(限制性核酸内切酶)错位切割双链DNA,产生5'或3'突出末端，称为黏性末端。黏性末端连接是指同一限制性酶切位点产生的两条黏性末端DNA片段一起退火时，黏性末端单链间进行碱基配对，然后在DNA连接酶催化作用下形成共价结合的重组DNA分子的过程(C对)。
故事情境
同一把剪刀在 U 盘和目的片段上切出同样的口，黏端互补，先配对再封口。这就是"剪刀配浆糊"那一步。 **
易错点
A 把 PCR 引物和模板的结合说成"连接"，D 把 cDNA 和 RNA 的杂交体说成"连接"，两个都不是共价连接。黏端连接的关键词是"同一限制酶"和"酶切位点"。
题号 ZT-2017N026A
下列选项中，符合Ⅱ类限制性内切核酸酶特点的是
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限制性内切核酸酶(限制性核酸内切酶)是指能识别双链DNA分子内部的特异位点并裂解磷酸二酯键的一类内切核酸酶，不具有连接酶活性(连接酶生成磷酸二酯键)(C错)。该酶主要存在于细菌内，可限制外源DNA,保护细菌体内自身DNA(D错),对维持细菌遗传性状的稳定性具有重要意义。根据酶的组成、所需因子及裂解DNA方式的不同，可将限制性内切核酸酶分为I、Ⅱ、Ⅲ三种类型。I类酶和Ⅲ类酶不在所识别的位点切割DNA(即特异性不强),故在重组DNA技术中应用价值不大。而Ⅱ类酶能在DNA回文结构序列内(A对)的特异酶解位点(B错)识别并切割DNA,在重组DNA技术中被广泛应用。
故事情境
这一题就是本篇"1.1 分子剪刀"的目录。识别回文、有特异位点、没有连接酶活性、切外源不切自身，四条一起记。 **
易错点
D 最有迷惑性，因为它听起来像"限制酶在细菌体内干活"。它确实在细菌体内，但切的是外源 DNA，自己的 DNA 靠甲基化保护。
题号 ZT-2010N038A
DNA重组技术中常用的工具酶有
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重组DNA技术中常用的工具酶包括限制性核酸内切酶(RE)(A对)、DNA连接酶(C对)、DNA聚合酶I(B对)、Klenow片段、逆转录酶(D对)、多聚核苷酸激酶、末端转移酶、碱性磷酸酶等。
故事情境
七件套全家福。四个选项全在，DNA 聚合酶 Ⅰ 也在，它是 Klenow 的母体。 **
易错点
别只记 Klenow，忘了它的母体 DNA 聚合酶 Ⅰ。题目问"常用工具酶"，DNA-pol Ⅰ 算。
题号 ZT-2023N147X
参与DNA重组过程的酶
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参与DNA重组过程的酶包括DNA连接酶(A对)、DNA聚合酶I、逆转录酶(B对)、Ⅱ型限制性核酸内切酶(D对)、多聚核苷酸激酶、碱性磷酸酶等。DNA连接酶是在DNA重组过程中起着关键作用的酶之一，它负责在DNA片段之间形成磷酸二酯键，从而连接DNA断裂的末端，这是DNA重组、修复和复制的一个重要步骤。逆转录酶也称为反转录酶，虽不直接参与细胞内的DNA重组，但可将RNA模板逆转录成DNA,这在基因工程实验中可用于生成重组DNA,因此也被视为与DNA重组相关。限制性核酸内切酶，能识别并切割特定DNA序列，是DNA重组技术的关键工具。RNA聚合酶(C错),虽然对转录过程至关重要，将DNA模板上的信息转录到RNA上，但并不直接参与DNA重组。
故事情境
还是七件套，只多了一个 RNA 聚合酶。它管转录，工具箱里没有它。 **
易错点
C 是唯一错的。RNA 聚合酶在转录那章很重要，但别把"重要"当成"哪儿都有"。
题号 ZT-2025N147X
常用于合成cDNA第二链的酶是
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Klenow 片段即DNA聚合酶I的大片段，保留了5'→3'聚合酶活性及3'→5'外切酶活性，常用于合成cDNA第二链(A对)和对双链DNA的3'端进行填补、标记。DNA连接酶(B错)用于催化DNA中相邻的5'-磷酸基和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键，使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接。碱性磷酸酶(C错)常用于切除核酸分子5'末端的磷酸基。末端转移酶(D错)常用于在核酸分子3'-羟基末端进行同质多聚物加尾。
故事情境
一链找逆转录酶，二链找 Klenow。这是 J5-3 那条 cDNA 流水线的下半段，本篇回收。 **
易错点
选项里没有逆转录酶，别硬找。B 是浆糊，C 是去磷酸，D 是加尾，三个都不合成链。
题号 ZT-2008N127B
常用于标记双链DNA3'端的酶是
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Klenow片段(A对)即DNA聚合酶I的大片段，保留了5'→3'聚合酶活性及3'→5'外切酶活性，常用于合成cDNA第二链和对双链DNA的3'端进行填补、标记。DNA连接酶(B错)用于催化DNA中相邻的5'-磷酸基和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键，使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接。碱性磷酸酶(C错)常用于切除核酸分子5'末端的磷酸基。末端转移酶(D错)常用于在核酸分子3'-羟基末端进行同质多聚物加尾。
故事情境
和上一题同一组选项，答案还是 Klenow。它的 5'→3' 聚合酶活性可以在 3' 端掺入带标记的核苷酸，标签就贴上了。 **
易错点
两题答案相同，说明 Klenow 的两个岗位都得记。别看到"3' 端"就选末端转移酶，加尾和标记是两件事。
题号 ZT-2008N128B
重组DNA技术中，可用于获取目的基因的方法有
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重组DNA技术中，可用于获取目的基因的方法有化学合成法、从基因组DNA文库和cDNA文库中获取目的DNA、PCR法等。化学合成法(A对)是通过人工直接合成DNA片段的方法。PCR(B对)是利用特异性引物引导及耐热性DNA聚合酶催化，经变性、退火、延伸等步骤循环扩增DNA片段的方法。Western blotting(C错)即蛋白质印迹，是一种定性及半定量检测蛋白质的方法(C错)。基因敲除(D错)是一种用基因剔除策略鉴定基因功能的方法。
故事情境
五法里考了两种。Western 是查蛋白的，基因敲除是建疾病动物模型的，都不在"分"这一步。 **
易错点
C 名字里有 blotting，容易跟 Southern、Northern 混成一家。三个印迹里只有 Southern 和 Northern 碰核酸，Western 碰的是蛋白。
题号 ZT-2009N161X
下列符合“转染”的技术操作是
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转染是指将外源DNA直接导入真核细胞(酵母除外)的过程(B对),常用的转染方法包括化学方法(如磷酸钙共沉淀法、脂质体融合法等)和物理方法(如显微注射法、电穿孔法等)。此外，将噬菌体DNA直接导入受体细菌的过程也称作转染。利用电穿孔技术将外源DNA转入大肠埃希菌(A错)属于转化。利用病毒载体将外源DNA转入大肠埃希菌(C错)属于感染。 ### 第三节 重组 DNA技术在医学中的应用
故事情境
按本篇的判断顺序走。A 是裸 DNA 进细菌，转化；B 是裸 DNA 进动物细胞，转染；C 是病毒颗粒进细菌，感染；D 是整体技术，不叫转染。 **
易错点
A 的电穿孔是转染常用的物理方法，方法一样，对象不一样，名字就不一样。看对象，不看手段。
题号 ZT-2021N026A
DNA重组技术中，用来筛选重组体的方法有
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用来筛选重组体的方法主要有遗传标记筛选法、序列特异性筛选法和亲和筛选法：①遗传标记筛选法利用载体上的遗传标记进行筛选，包括利用抗生素抗性标志筛选、利用基因的插入失活1插入表达特性筛选、利用标志补救筛选(A对)、利用噬菌体的包装特性进行筛选等；②序列特异性筛选法利用目的DNA的序列特异性进行筛选，包括RE酶切法、PCR法、核酸杂交法(分2 第十九章 DNA重组和重组 DNA技术子杂交法)(B对)、DNA测序法等；③亲和筛选法利用特异性抗体与产物结合(C对)进行筛选。紫外分光光度计可测定DNA分子的紫外吸收光值，对DNA分子进行定性和定量分析，但不能对重组体DNA分子与非重组体DNA分子作出区分，因此不能用来筛选重组体(D错)。
故事情境
三类筛选各出一个代表。标志补救是遗传标志，分子杂交是序列特异性，抗体是亲和。D 是仪器，不是筛选思路。 **
易错点
D 最容易骗人，因为"紫外分光光度计"听起来很专业。它测的是浓度和纯度，两管 DNA 在 260 nm 都有吸收，分不出谁装了目的基因。
题号 ZT-2010N160X
分析蛋白质表达量的实验室技术是
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蛋白质在电泳之后可以从胶中转移并固定到膜型材料上，再依靠与溶液中相应的蛋白质分子相互结合来进行定性定量分析，这种蛋白质印迹技术称为Western blotting(B对)。Southernblotting(A错)为DNA印迹技术，主要用于基因组DNA的定性和定量分析。Northern blotting(C错)为RNA印迹技术，主要用于检测特定组织或细胞中已知的特异性mRNA和非编码RNA的表达水平，也可以比较不同组织和细胞中的同一基因的表达情况。PCR(D错)主要用于扩增特定的DNA片段。
故事情境
南到北到西，最后一个查蛋白。Western 用抗体认，所以又叫免疫印迹。 **
易错点
四个选项都是熟词，靠"查什么"定位。蛋白对应 Western，RNA 对应 Northern，DNA 对应 Southern。
题号 ZT-2020N028A
常用于研究基因表达的分子生物学技术有
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基因表达产物包括RNA和蛋白质/多肽，因此检测基因表达水平就是检测RNA和蛋白质水平。Northern blotting(A对)即RNA印迹，用于检测RNA的表达水平。Western blotting(C对)即蛋白质印迹，用于检测蛋白质的表达水平。RT-PCR(D对)即逆转录PCR,可用于获取目的基因或检测RNA表达水平。Southern blotting(B错)即DNA印迹，用于检测DNA的表达水平。 ### 第三节 DNA测序技术 ### 第四节 生物分子相互作用研究技术
故事情境
基因表达看产物，产物是 RNA 和蛋白。Northern 查 RNA，Western 查蛋白，RT-PCR 也查 RNA。Southern 查的是 DNA，查的是"家底"，不是"最近在干什么"。 **
易错点
B 是唯一的坑。DNA 水平的变化不等于表达水平的变化，这个区分在 2013N132B 又考了一次。
题号 ZT-2008N162X
用于检测基因表达水平的测定技术是
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基因表达产物包括RNA和蛋白质/多肽，因此检测基因表达水平就是检测RNA和蛋白质水平。蛋白质印迹分析(A对)也被称为Western blotting,是一种常见的定性及半定量检测蛋白质表达水平的实验技术。酵母双杂交技术(B错)用于分析蛋白质-蛋白质之间的相互作用。电泳迁移率变动测定(C错)主要用于分析 DNA-蛋白质之间的相互作用。基因剔除技术(D错)主要用于分析基因的功能。 ### 第二节 聚合酶链反应技术
故事情境
和上一题同一口径，基因表达包含蛋白产物，所以 Western 算。酵母双杂交查互作，EMSA 查 DNA-蛋白，基因剔除查功能。 **
易错点
这题最容易犯的错是觉得"基因表达"只能查 RNA。教材口径是 RNA 和蛋白都算，记住。
题号 ZT-2013N132B
利用聚合酶链反应扩增特异DNA序列的重要原因之一是反应体系内 存在
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聚合酶链反应(PCR)是一种在体外大量扩增特异DNA序列(目的基因片段)的分子生物学技术。聚合酶链反应以拟扩增的DNA分子为模板，以1对与模板互补的特异核苷酸片段(DNA片段)为引物，以dNTP为基本原料，在耐热性DNA聚合酶作用下，扩增出大量特异 DNA序列(目的基因片段)。扩增出的DNA序列的特异性取决于DNA引物的特异性，由于有特异DNA引物(C对D错)的存在，才能扩增出特异的DNA片段。DNA聚合酶为所有PCR反应所共有，不能决定反应特异性(A错)。PCR的模板是DNA而不是RNA(B错)。
故事情境
PCR 是一台复印机，引物就是"从第几页复印到第几页"的那张纸条。酶是通用的，纸条是专用的。 **
易错点
A 听着像"核心"，但 Taq 每个 PCR 都有，决定不了扩哪一段。D 把引物说成 RNA，PCR 用的是 DNA 引物。
题号 ZT-2007N171A-JC
PCR及其衍生技术主要应用于
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PCR(聚合酶链反应)是一种在体外大量扩增目的基因片段的分子生物学技术。PCR的主要用途包括：①目的基因的克隆(A对),应用PCR技术可将人们感兴趣的DNA片段进行大量扩增、克隆；②基因的体外突变(D对),利用PCR技术可以随意设计引物在体外对目的基因片段进行嵌合、缺失、点突变等改造；③DNA和RNA的微量分析，PCR技术高度敏感，对模板DNA的量的要求很低，是DNA和RNA微量分析(RNA微量分析利用RT-PCR技术，属于基因表达检测范畴)(B对)最好的方法；④DNA的序列测定(C对),将PCR技术引入DNA序列测定，使得测定工序大为简单，也提高了测序的速度；⑤基因的突变分析，PCR与其他技术结合可以大大提高基因突变检测的敏感性，例如单链构象多态性分析、等位基因特异的寡核苷酸探针分析等。生物第十八章 常用的分子生物学技术
故事情境
讲义说"基因（DNA）相关 yyds"，六条用途。四个选项分别是克隆、表达检测、序列分析、体外突变，全在。 **
易错点
C "DNA 序列分析"容易被忽略，因为直觉上测序是另一套技术。PCR 产物直接拿去做测序，现在就是常规流程。
题号 ZT-2014N162X
PCR技术的用途有
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PCR中文名聚合酶链式反应，是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，PCR技术的主要用途有：①基因片段的获得(C对);②DNA和RNA的微量分析；③DNA序列分析；④基因变异的分析(B对);⑤基因的体外突变(D对)。PCR技术与其他分子生物学技术的结合，形成多种PCR 衍生技术，如逆转录PCR技术、原位PCR技术、实时PCR技术等，其中实时PCR技术可对基因表达水平进行检测(A对)。
故事情境
还是那六条，换个说法。表达检测靠实时 PCR，变异分析靠产物比对，片段获得靠扩增，序列突变靠设计引物改。 **
易错点
D 说"基因序列的突变"，不是"检测突变"，是主动改序列，也就是体外突变。两个方向别混。
题号 ZT-2022N147X
用于分析蛋白质-蛋白质相互作用的技术是
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标准解析
目前常用的分析蛋白质-蛋白质相互作用的技术包括酵母双杂交(B对)、各种亲和分离层析(亲和色谱、免疫共沉淀、标签蛋白沉淀等)、FRET(荧光能量共振转移)效应分析、噬菌体显示系统筛选等。蛋白质印迹分析(Western blotting)(A错),是一种用于定性及半定量检测蛋白质表达水平的技术。电泳迁移率变动测定(EMSA)(C错)是一种用于分析 DNA-蛋白质相互作用的技术。基因剔除技术(D错)是一种用基因剔除策略鉴定基因功能的技术。
故事情境
双黄蛋是蛋白-蛋白。EMSA 带"电泳迁移"，是 DNA-蛋白，别被"电泳"两个字带到蛋白电泳上去。 **
易错点
C 是这题最大的坑。名字里有电泳，但跑的是 DNA 探针和蛋白的复合物，查的是 DNA-蛋白。
题号 ZT-2013N131B
用于研究蛋白质-蛋白质相互作用的技术是
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标准解析
酵母双杂交技术(A对)是一种在酵母细胞内研究蛋白质-蛋白质相互作用的方法。其原理是利用酵母的转录因子作为“诱饵”蛋白与目的蛋白融合，通过检测报告基因的表达来判断两种蛋白之间是否存在相互作用。免疫共沉淀技术(B对)是利用抗原和抗体之间的特异性结合来研究蛋白质-蛋白质相互作用的方法。通过将目标蛋白与特异性抗体结合形成免疫复合物，然后利用蛋白A/G等试剂将免疫复合物沉淀下来，从而分离出与目标蛋白相互作用的蛋白质。GSTPull-down技术(C对)是一种利用谷胱甘肽S转移酶(GST)融合蛋白来研究蛋白质-蛋白质相互作用的方法。通过将目标蛋白与GST标签融合表达，然后利用GST标签与固定在珠子上的谷胱甘肽特异性结合的特性，将目标蛋白及其相互作用的蛋白质一起拉下来，从而实现对蛋白质相互作用的检测。ChIP(D错)即染色质免疫共沉淀技术，是一种研究蛋白质与DNA相互作用的方法，而不是研究蛋白质-蛋白质相互作用的技术。
故事情境
三套蛋白-蛋白工具全在。ChIP 虽然叫"免疫沉淀"，沉的是染色质，抓的是 DNA，归 DNA-蛋白。 **
易错点
D 是唯一的坑。看到"沉淀"别就归到蛋白-蛋白，得看它沉下来的东西里装的是 DNA 还是另一个蛋白。
题号 ZT-2024N143X
测定蛋白质-蛋白质相互作用的实验是
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标准解析
分析蛋白质与蛋白质相互作用的技术是酵母双杂交法(A对)。聚合酶链反应(PCR)(B错)用于扩增目的DNA。DNA末端合成终止法(C错)即Sanger双脱氧测序法，用于测定目的DNA的碱基序列。染色质免疫沉淀法(D错)用于研究DNA与蛋白质的相互作用。
故事情境
这一组选项把四类技术摆在一起：双杂交查蛋白-蛋白，PCR 扩 DNA，Sanger 测序，ChIP 查 DNA-蛋白。 **
易错点
C 的"DNA 链末端合成终止法"名字长，其实就是 Sanger 测序，跟相互作用没关系。
题号 ZT-2017N122B
研究DNA-蛋白质相互作用的实验是
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标准解析
研究DNA与蛋白质相互作用的技术是染色质免疫沉淀法(D对)。酵母双杂交法(A错)用于分析蛋白质-蛋白质相互作用。聚合酶链反应(PCR)(B错)用于扩增目的DNA。DNA末端合成终止法(C错)即Sanger 双脱氧测序法，用于测定目的DNA的碱基序列。
故事情境
上一题 A，这一题 D，同一组选项考分家。ChIP 是体内抓现行：交联、打断、抗体沉淀、测 DNA。 **
易错点
别把 ChIP 和免疫共沉淀混成一个。Co-IP 抓的是蛋白，ChIP 抓的是蛋白加 DNA。
题号 ZT-2017N123B
能够测定DNA-蛋白质相互作用的实验技术有
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标准解析
能测定DNA-蛋白质相互作用的试验方法是电泳迁移率变动分析(A对)和染色质免疫沉淀法(C对)。酵母双杂交法(B错)为测定蛋白质-蛋白质相互作用的试验方法。酶联免疫法(D错)是一种建立在抗原-抗体反应(蛋白质-蛋白质相互作用)基础上的蛋白质/多肽的定性及定量分析方法。
故事情境
口诀"带电泳迁移、带染色质"都是 DNA-蛋白，A 和 C 一起中。B 是双黄蛋，D 是定量检测。 **
易错点
D 的解析承认它建立在蛋白-蛋白相互作用上，但它不做"相互作用研究"，只做定性定量。这个分寸要拿准。
题号 ZT-2018N147X
目前常用于分析体内DNA与蛋白质相互作用的分子生物学技术是
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标准解析
目前常用于分析体内DNA与蛋白质相互作用的分子生物学技术包括电泳迁移率变动分析(凝胶迁移变动分析)(B对)和染色质免疫沉淀技术。标签蛋白沉淀(A错)和酵母双杂交(D错)是研究蛋白质与蛋白质相互作用的技术。蛋白质印迹技术(C错)主要用于蛋白质的定性及半定量检测，也可以用于研究蛋白质与蛋白质相互作用。国第五节 基因表达分析技术
故事情境
这一题按官方答案记 B。本篇正文把讲义的标注也保留了：EMSA 在体外做，ChIP 才是体内的那个。真题解析把两个技术都算进"常用于分析体内 DNA 与蛋白质相互作用"的范围，单选题里给了 B，别跟答案较劲。 **
易错点
最大的坑是"体内"两个字。记住答案 B，同时把"EMSA 体外、ChIP 体内"单独背一条，两套口径都留着，考哪套用哪套。
题号 ZT-2023N028A
可应用于基因启动子结构分析的技术有
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标准解析
基因启动子是位于基因上游区域的DNA序列，对基因的表达起着关键的调控作用。启动子区域通常包含多个特定的序列元件，这些元件可以被不同的转录因子识别和结合，从而调节基因的转录活性。分析基因启动子结构对于理解基因表达调控机制至关重要。PCR结合测序技术(A对)是分析基因启动子结构的重要手段之一。通过PCR技术可以特异性地扩增出目的基因的启动子区域，然后利用测序技术对扩增产物进行测序，从而得到启动子区域的核苷酸序列信息。这些信息对于分析启动子的结构、转录因子结合位点以及调控机制具有重要意义。核酸-蛋白质相互作用技术(B对)也是研究基因启动子结构的有效方法。启动子是转录因子结合的位点，转录因子通过与启动子的相互作用来调控基因的表达。因此，利用核酸-蛋白质相互作用技术可以分析转录因子与启动子的结合情况，从而揭示启动子的结构和功能。生物信息学预测(D对)在基因启动子结构分析中发挥着重要作用。通过利用生物信息学工具和数据库，可以对启动子区域进行序列分析、转录因子结合位点预测以及功能注释等。这些预测结果可以为实验验证提供有价值的线索和指导，从而加速对启动子结构和功能的研究进程。标签蛋白沉淀技术(C错)通常用于研究蛋白质-蛋白质相互作用，而不应用于基因启动子结构分析。 ### 第十九章 DNA重组和重组DNA技术 ### 第一节 自然界的DNA重组和基因转移 ### 第二节 重组 DNA技术
故事情境
启动子是 DNA，分析它要么读序列（PCR 加测序），要么看谁结合它（核酸-蛋白互作），要么用电脑预测。标签蛋白沉淀拉的是蛋白，跟启动子不搭。 **
易错点
C 又是"沉淀"的陷阱。它和 GST pull-down 是一家，查蛋白-蛋白，不查 DNA 序列。
题号 ZT-2024N144X
目前基因治疗所采用的方法有
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基因治疗是通过一定方式将人正常基因或有治疗作用的DNA片段导入人体靶细胞以矫正或置换致病基因的治疗方法。目前基因治疗所采用的方法有：①缺陷基因精确的原位修复，包括对致病基因的突变碱基进行纠正的基因矫正(A对)和用正常基因通过重组原位替换致病基因的基因置换(B对);②基因增补(C对),该方法不删除突变的致病基因，而在基因组的某一位点额外插入正常基因，使体内表达出功能正常的蛋白质，从而达到治疗疾病的目的，基因增补是目前临床上主要采用的基因治疗方法；③基因沉默或失活(D对),该方法向患者体内导入有抑制基因表达作用的核酸，阻断致病基因的异常表达，从而达到治疗疾病的目的。
故事情境
治疗四策全选。矫正和置换是最理想的两种，虽然没突破，但确实"采用"了，只是没成为主力。 **
易错点
别因为"矫正和置换技术尚未突破"就把 A、B 排除。题干问"采用的方法"，不是"主要方法"。第 28 题才问"主要"。
题号 ZT-2011N162X
目前基因治疗主要采用的方式是
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标准解析
目前基因治疗所采用的基本方法有基因矫正、基因置换(对患者缺陷基因进行重组)(A错)、基因增补和基因失活等，其中基因增补是目前临床上主要采用的方法。基因增补不删除突变的致病基因，而在靶细胞基因组的某一位点额外插入正常基因(目的基因),使体内表达出功能正常的蛋白质，从而达到治疗疾病的目的。基因增补的具体实施方案为：先将需要接受目的基因的细胞从体内取出，在体外培养，然后将携带有目的基因的载体导入细胞内，最后筛选出表达目的基因的细胞，经过繁殖扩大后输入患者体内(D对)。提高患者的DNA合成能力(B错)和调整患者DNA修复的酶类(C错)不属于目前基因治疗的方法。 ### 第二十五章 肝的生物化学 ### 第一节 肝在物质代谢中的作用
故事情境
D 描述的是基因增补的六步流程：取细胞、体外培养、载体导入、筛选、扩增、回输。增补是目前的主力，所以"主要方式"选它。 **
易错点
A 是基因矫正和基因置换，最理想但没突破，不是"主要"。这是第 27 题的反面问法，一宽一窄。
题号 ZT-2013N040A
重组 DNA技术目前在医学领域中的应用
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标准解析
重组DNA目前在医学领域中的应用主要是基因工程药物的研发(C对)。中药有效成分的提取(A错)主要涉及到化学分离技术，并不直接关联到重组DNA技术。影像技术的改进(B错),如CT、MRI等医疗设备和技术的发展，属于医学影像领域，而非重组DNA技术的直接应用范畴。药物在人体内的示踪(D错)主要是药理学和药物代谢动力学的研究内容。 ### 第二十章 细胞信号转导与疾病 ### 第一节 细胞信号转导概述 ### 第二节 细胞内信号转导分子
故事情境
让细菌当制药工厂，这是重组 DNA 最成熟的医学落点。1982 年的重组人胰岛素就是第一个产品。 **
易错点
这题用排除法最快。A 是化学分离，B 是设备，D 是药理和药代，三个都不碰 DNA。 ---
题号 ZT-2025N026A